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    安捷伦 用溶剂清洗色谱柱
    日期:2016/9/1 11:07:43 来源:北京色谱信息网   【字体:

     安捷伦 用溶剂清洗色谱柱

    用溶剂清洗色谱柱需要将色谱柱从GC上拆下,然后用数毫升溶剂通过色谱柱。任何可溶解于冲洗溶剂的残留物都会冲洗出色谱柱。在色谱柱仍然安装在GC中的情况下,注入大量溶剂将不能清洗色谱柱,并且这样做也不能从色谱柱出去任何污染物。毛细管GC色谱柱必须具有键合和交联的固定相,才能用溶剂冲洗。用溶剂冲洗非键合的固定相会造成色谱柱的严重损坏。

    需要使用色谱柱冲洗装置使溶剂注入色谱柱(色谱柱清洗工具包,部件号430-3000)。溶剂清洗装置会连接到加压气源上(N2He),同时色谱柱插入清洗装置中,将溶剂加入到样品瓶中,然后使用气源对样品瓶加压,压力推动溶剂流过色谱柱,残留污染物溶解到溶剂中国,并随溶剂被反向冲出色谱柱。然后将溶剂吹扫出色谱柱,在对色谱柱进行适当老化。

    清洗色谱柱之前,要从柱前端(即进样口一端)截去0.5m,将色谱柱链接检测器的一端插入冲洗装置中,通常使用多种溶剂清洗色谱柱。每一种后续溶剂必须与前一种溶剂互溶。应避免使用高沸点溶剂,尤其是作为最后一种清洗溶剂。样品基质溶剂通常是不错的选择。

    推荐使用甲醇.二氯甲烷和己烷,大部分情况下效果很好。为避免使用卤代溶剂,可以用丙酮替换二氯甲烷,当然,二氯甲烷是最理想的清洗溶剂之一。如果进样的水性样品(如生物体液和组织),冲洗时要先用水,再用甲醇。某些来自水性样品的残留只能溶于水中,而不溶于有机溶剂。用水和醇类(如甲醇。乙醇和异丙醇)冲洗键合的聚乙二醇类固定相(比如DB-WAX,DB-WAXetrDB-FFAP,HP-INNOWax)一般仅作为最后的手段。

    不同内径色谱柱建议使用的溶剂体积。使用更大量的溶剂对色谱柱虽然没有损害,单很少得出更好的效果,并且十分浪费。加入第一种溶剂后,给冲洗装置加压,但压力更低于20psi.使用可以保持溶剂流速低于1ml/min的最高压力。除了大多数0.53mm内径的色谱柱外,在流速到达1ml/min之前,冲洗装置压力都将到达20PSI。对于使用比重大或者粘度高的溶剂,以及更长或更小内径的色谱柱,就需要更长的冲洗时间。当第一种溶剂全部或者大部分进入色谱柱后,加入第二种溶剂。不需要前一红溶剂完全流出色谱柱在开始用下一种溶剂冲洗色谱柱。

    当最后的溶剂离开色谱柱后,急需保藏加压气体流过色谱柱5-10min。将色谱柱安装到进样器上,并打开载气。让载气通过色谱柱5-10分钟。将色谱柱安装到哦检测器(如果愿意也可以不安装到检测器)采用程序升温从40-50°C开始,升温速率2-3°C/min,直到达到色谱柱的使用温度上限,在此温度下保持1-4小时,知道色谱柱完全老化好。

     

     

    用于清洗色谱柱的溶剂体积

    色谱柱内径mm 0.18-0.2    溶剂体积为3-4ml

    色谱柱内径mm 0.25         溶剂体积为4-5ml

    色谱柱内径mm 0.32        溶剂体积为6-7ml

    色谱柱内径mm 0.45        溶剂体积为7-8ml

    色谱柱内径mm 0.53        溶剂体积为10-12ml

    使用较大的体积不会损坏色谱柱

     

     

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